替考拉宁

替考拉宁TikaolaningTeicoplanin

本品为34-O-[2-（乙酰氨基）-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖基]-22，31-二氯-7-去甲基-64-O-去甲基-19-脱氧-56-O-[2-脱氧-2-（R取代氨基）-β-D-吡喃葡萄糖基]-42-O-α-D-吡喃甘露糖基瑞斯托霉素A糖苷配基。按无水、无氯化钠与无溶剂物计算，每1mg的效价不得少于900替考拉宁单位。
【性状】本品为白色至淡黄色的粉末；无臭；有引湿性。
本品在水中易溶，在二甲基甲酰胺中溶解，在乙腈、甲醇、乙醇和丙酮中几乎不溶。
【鉴别】（1）取本品约10mg，加水1ml溶解后，加2%茚三酮的乙醇溶液2ml，置水浴中加热5分钟，溶液显紫蓝色。
（2）取本品约30mg，加水1ml溶解后，沿管壁缓缓加入蒽酮试液（取蒽酮0.2g，溶于95%硫酸溶液100ml中，摇匀，即得）2ml，轻轻摇匀，溶液即变成绿色。
（3）在替考拉宁组分项下记录的色谱图中，供试品溶液中应出现与标准品溶液中A₂组各组分（TA_2-1、TA_2-2、TA_2-3、TA_2-4和TA_2-5）峰保留时间一致的色谱峰。
（4）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集 1214图）一致。
【检查】酸碱度 取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，依法测定（通则 0631），pH值应为6.3～7.7。
溶液的澄清度与颜色 取本品5份，分别加水制成每1ml中约含50mg的溶液，溶液应澄清无色；如显浑浊，与2号浊度标准液（通则 0902第一法）比较，均不得更浓；如显色，与黄色或橙黄色5号标准比色液（通则 0901第一法）比较，均不得更深。
氯化钠 取本品约0.5g，精密称定，精密加0.9%氯化钠注射液10ml，加水稀释至50ml，轻摇使溶解，照电位滴定法（通则 0701），用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定至终点；另精密量取0.9%氯化钠注射液10ml，同法做空白校正，按滴定液消耗体积的差值计算供试品中氯化钠的含量。每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于5.844mg的NaCl。含氯化钠不得过5.0%。
残留溶剂 取本品约0.2g，精密称定，置顶空瓶中，精密加水5ml使溶解，密封，作为供试品溶液；精密称取丙酮适量，用水溶解并定量稀释制成每1ml中约含400μg的溶液，精密量取5ml，置顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。照残留溶剂测定法（通则 0861第一法）测定，以5%二苯基-95%聚二甲基硅氧烷（或极性相近）为固定液的毛细管柱为色谱柱；柱温为50℃；进样口温度为200℃；检测器温度为250℃；载气为氦气或氮气。顶空瓶平衡温度为85℃，平衡时间为30分钟。取供试品溶液和对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，丙酮的残留量不得过1.0%。
水分 取本品，照水分测定法（通则 0832第一法1）测定，含水分不得过10.0%。
重金属 取本品1.0g，于500～600℃炽灼至完全灰化，取残渣照重金属检查法（通则 0821第二法）试验，含重金属不得过百万分之二十。
替考拉宁组分 取本品和替考拉宁标准品，分别加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含2mg的溶液，作为供试品溶液和标准品溶液，照高效液相色谱法（通则 0512）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以二水合磷酸二氢钠7.8g，加水约1650ml使溶解，加乙腈300ml，用氢氧化钠试液调节pH值为6.0，加水稀释至2000ml为流动相A；以二水合磷酸二氢钠7.8g，加水约550ml使溶解，加乙腈1400ml，用氢氧化钠试液调节pH值为6.0，加水稀释至2000ml为流动相B。检测波长为254nm。按下表进行线性梯度洗脱。
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时间（分钟） 流动相A（%） 流动相B（%）
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0
100
0
32
70
30
40
50
50
42
100
0
52
100
0
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取标准品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，替考拉宁A_2-2组分峰的保留时间约为24分钟，各组分的出峰顺序及相对保留时间为：
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组分名称 相对于A_2-2的保留时间（RRT）
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A3组分
≤0.42

A3-1
0. 29

A2组分
＞0.42～≤1.25
A2-1
0.91

A2-2
1.00

A2-3
1.04

A2-4
1.17

A2-5
1.20

其他成分
＞1.25

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拖尾因子以A_3-1峰计算应不大于2.2，重复进样3次，以A_2-2峰面积计算，相对标准偏差应不大于2.0%。再精密量取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，量取各组分的峰面积，按式（1）、式（2）和式（3）分别计算各组分的含量，替考拉宁A₂（TA₂）组分之和不少于80.0%，替考拉宁A₃（TA₃）组分之和不得过15.0%，其他成分之和不得过5.0%。
替考拉宁A₂组分之和（％）=
Sa/（Sa+0.83Sb+Sc）×100%
（1）
替考拉宁A₃组分之和（％）=
0.83Sb/（Sa+0.83Sb+Sc）×100% （2）
其他成分之和（％）= Sc/（Sa+0.83Sb+Sc）×100%
（3）
式中Sa为替考拉宁A₂组分的峰面积总和；
Sb为替考拉宁A₃组分的峰面积总和；
Sc为其他成分的峰面积总和。
细菌内毒素 取本品，依法检查（通则 1143），每1mg替考拉宁中含内毒素的量应小于0.30EU。（供注射用）
【效价测定】取本品适量，精密称定，用灭菌水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1000单位的溶液，照抗生素微生物检定法（通则 1201第一法）测定。1000替考拉宁单位相当于1mg的替考拉宁。
【类别】抗生素类药。
【贮藏】密封，在冷处保存。
【制剂】注射用替考拉宁