1148 溶血与凝聚检查法 本法系将一定量供试品与2%的家兔红细胞混悬液混合,温育一定时间后,观察其对红细胞状态是否产生影响的一种方法。
2%红细胞混悬液的制备 取健康家兔血液,放入含玻璃珠的锥形瓶中振摇10分钟,或用玻璃棒搅动血液,以除去纤维蛋白原,使成脱纤血液。加入0.9%氯化钠溶液约10倍量,摇匀,每分钟1000~1500转离心15分钟,除去上清液,沉淀的红细胞再用0.9%氯化钠溶液按上述方法洗涤2~3次,至上清液不显红色为止。将所得红细胞用0.9%氯化钠溶液制成2%的混悬液,供试验用。
供试品溶液的制备 除另有规定外,按品种项下规定的浓度制成供试品溶液。
检查法 取洁净玻璃试管5只,编号,1、2号管为供试品管,3号管为阴性对照管,4号管为阳性对照管,5号管为供试品对照管。按下表所示依次加入2%红细胞悬液、0.9%氯化钠溶液、纯化水,混匀后,立即置37℃±0.5℃的恒温箱中进行温育。3小时后观察溶血和凝聚反应。
如试管中的溶液呈澄明红色,管底无细胞残留或有少量红细胞残留,表明有溶血发生;如红细胞全部下沉,上清液无色澄明,或上清液虽有色澄明,但1、2号管和5号管肉眼观察无明显差异,则表明无溶血发生。
若溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀,轻轻倒转3次仍不分散,表明可能有红细胞凝聚发生,应进一步置显微镜下观察,如可见红细胞聚集为凝聚。
结果判断 当阴性对照管无溶血和凝聚发生,阳性对照管有溶血发生,若2支供试品管中的溶液在3小时内均不发生溶血和凝聚,判定供试品符合规定;若有1支供试品管的溶液在3小时内发生溶血和(或)凝聚,应设4支供试品管进行复试,其供试品管的溶液在3小时内均不得发生溶血和(或)凝聚,否则判定供试品不符合规定。
关键字:1148 溶血