3420 伤寒Vi多糖分子大小测定法 本法用于测定细菌荚膜多糖在色谱柱中的分配系数(K
D)和多糖在规定K
D值以前的回收率。
试剂、色谱柱的制备与色谱柱标定 同通则3419第二法。
测定法 取供试品约1ml(含多糖抗原3~5mg),加至已标定的色谱柱中,用流动相洗脱,流速为每小时15~20ml,用组分收集器收集洗脱液,每管3~5ml。照O-乙酰基测定法(通则3117),测定每管洗脱液中O-乙酰基的含量,求出O-乙酰基含量最高时的洗脱体积,即为多糖主峰峰顶洗脱体积V
e。
按下式计算:
【附注】过柱操作在10~20℃进行。
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