冻干破伤风抗毒素

冻干破伤风抗毒素Donggan Poshangfeng KangdusuTetanus Antito xin ，Freeze-dried
本品系由破伤风类毒素免疫马所得的血浆，经胃酶消化后纯化制成的冻干抗毒素球蛋白制剂。用于预防和治疗破伤风梭菌引起的感染。
1 基本要求
生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
2 制造
2.1 抗原与佐剂
应符合“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定。
2.2 免疫动物及血浆
2.2.1 免疫动物
免疫用马匹必须符合“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定。
2.2.2 采血与分离血浆
按“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定进行。用动物法或其他适宜的方法测定免疫血清效价，不低于1200IU/ml时，即可采血。分离之血浆可加入适宜防腐剂，并应做无菌检查（通则1101）。
2.3 胃酶
用生理氯化钠溶液将胃酶配制成1mg/ml溶液，进行类A血型物质含量测定（通则3415），应不高于1.0μg/ml。
2.4 原液
2.4.1 原料血浆
原料血浆的破伤风抗毒素效价应不低于1000IU/ml（通则3508）。血浆在保存期间，如发现有明显的溶血、染菌及其他异常现象，不得用于制备。
2.4.2 制备
2.4.2.1 消化
将免疫血浆稀释后，加入适量胃酶，如果必要还可加入适量甲苯，调整适宜pH值后，在适宜温度下消化一定时间。
2.4.2.2 纯化
采用加温、硫酸铵盐析、明矾吸附等步骤进行纯化。
2.4.2.3 浓缩、澄清及除菌过滤
浓缩可采用超滤或硫酸铵沉淀法进行。可加入适量硫柳汞或间甲酚作为防腐剂，然后澄清、除菌过滤。
纯化后的抗毒素原液应置2～8℃避光保存至少1个月作为稳定期。
2.4.3 原液检定
按3.1项进行。
2.5 半成品
2.5.1 配制
将检定合格的原液，按成品规格以灭菌注射用水稀释，调整效价、蛋白质浓度、pH值及氯化钠含量，除菌过滤。
2.5.2半成品检定
按3. 2项进行。
2.6 成品
2.6.1分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.6.2分装及冻干
应符合“生物制品分装和冻干规程”及通则0102有关规定。在冻干过程中制品温度应不高于35℃，真空或充氮封口。
2.6.3 规格
复溶后每瓶0.75ml，含破伤风抗毒素1500IU（预防用）或每瓶2.5ml ，含破伤风抗毒素10000IU（治疗用）。
2.6.4 包装
应符合“生物制品包装规程”及通则0102有关规定。
3 检定
3.1 原液检定
3.1.1 抗体效价
依法测定（通则3508）。
3.1.2 无菌检查
依法检查（通则1101），应符合规定。
3.1.3 热原检查
依法检查（通则1142），应符合规定。注射剂量按家兔体重每1kg注射3.0ml。
3.2 半成品检定
无菌检查
依法检查（通则1101），应符合规定。
3.3 成品检定
除水分测定、装量差异检查外，应按标示量加入灭菌注射用水，复溶后进行以下检定。
3.3.1 鉴别试验
每批成品至少抽取1瓶做以下鉴别试验。
3.3.1.1 动物中和试验或特异沉淀反应
按通则3508进行，供试品应能中和破伤风毒素；或采用免疫双扩散法（通则3403），供试品应与破伤风类毒素产生特异沉淀线。
3.3.1.2 免疫双扩散或酶联免疫吸附试验
采用免疫双扩散法（通则3403）进行，供试品仅与抗马的血清产生沉淀线；或采用酶联免疫法（通则3418），供试品应与马IgG抗体反应呈阳性。
3.3.2 物理检查
3.3.2.1 外观
应为白色或淡黄色的疏松体，按标示量加入注射用水，轻摇后应于15分钟内完全溶解为无色或淡黄色的澄明液体，无异物。
3.3.2.2 渗透压摩尔浓度
应符合批准的要求（通则0632）。
3.3.2.3 装量差异
依法检查（通则0102），应符合规定。
3.3.3 化学检定
3.3.3.1 水分
应不高于3.0%（通则0832）。
3.3.3.2 pH 值
应为6.0～7.0（通则0631）。
3.3.3.3 蛋白质含量
应不高于100g/L（通则0731第一法）。
3.3.3.4 氯化钠含量
应为 7.5～9.5g/L（通则3107）。
3.3.3.5 硫酸铵含量
应不高于1.0g/L（通则3104）。
3.3.3.6 防腐剂含量
如加硫柳汞，含量应不高于0.1g/L（通则3115）；如加间甲酚，含量应不高于2.5g/L（通则3114）。
3.3.3.7 甲苯残留量
生产工艺中如添加甲苯，需检测甲苯残留量，应不高于0.089%（通则 0861）。
3.3.4 纯度
3.3.4.1 白蛋白检查
将供试品稀释至2%的蛋白质浓度，进行琼脂糖凝胶电泳分析（通则0541第三法），应不含或仅含痕量白蛋白迁移率的蛋白质成分。
3.3.4.2 F（ab'）₂ 含量
采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（通则0541第五法）测定，上样量约25μg，F（ab'）₂含量预防用的应不低于60%，治疗用的应不低于70%；IgG含量应不高于5%。
3.3.5 抗体效价
预防用的效价应不低于2000IU/ml，比活性为每1g蛋白质应不低于45000IU；治疗用的效价应不低于4000IU/ml，比活性为每1g蛋白质应不低于55000IU （通则3508）。每瓶破伤风抗毒素装量应不低于标示量。
3.3.6 无菌检查
依法检查（通则1101），应符合规定。
3.3.7 热原检查
依法检查（通则1142），应符合规定。注射剂量按家兔体重每1kg注射3.0ml。
3.3.8 异常毒性检查
依法检查（通则1141），应符合规定。
4 稀释剂
稀释剂为灭菌注射用水，稀释剂的生产应符合批准的要求。
灭菌注射用水应符合本版药典（二部）的相关规定。
5 保存、运输及有效期
于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为60个月。
6 使用说明
应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。