维生素B12

维生素B12Weishengsu B12Vitamin B12

本品为Coα-[α-（5，6-二甲基苯并咪唑基）]-Coβ氰钴酰胺。按干燥品计算，含C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P不得少于96.0%。
【性状】本品为深红色结晶或结晶性粉末；无臭；引湿性强。
本品在水或乙醇中略溶，在丙酮、三氯甲烷或乙醚中不溶。
【鉴别】（1）取本品约1mg，加硫酸氢钾约50mg，置坩埚中，灼烧至熔融，放冷，加水3ml，煮沸使溶解，加酚酞指示液1滴，滴加氢氧化钠试液至显淡红色后，加醋酸钠0.5g、稀醋酸0.5ml与0.2% 1-亚硝基-2-萘酚-3，6-二磺酸钠溶液0.5ml，即显红色或橙红色；加盐酸0.5ml，煮沸1分钟，颜色不消失。
（2）取含量测定项下的供试品溶液，照紫外-可见分光光度法（通则 0401）测定，在278nm、361nm与550nm的波长处有最大吸收。361nm波长处的吸光度与278nm波长处的吸光度的比值应为1.70～1.88。361nm波长处的吸光度与550nm波长处的吸光度的比值应为3.15～3.45。
（3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集 449图）一致。
【检查】溶液的澄清度 取本品20mg，加水10ml溶解后，溶液应澄清。
有关物质 避光操作，溶液临用新制。取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取本品约25mg，置25ml量瓶中，加水10ml使溶解，加0.1%氯胺T溶液5ml与0.05mol/L盐酸溶液0.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，放置5分钟，精密量取1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；再精密量取对照溶液1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度溶液。照高效液相色谱法（通则 0512）试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.028mol/L磷酸氢二钠溶液（用磷酸调节pH值至3.5）（26：74）为流动相，检测波长为361nm。系统适用性溶液中应出现维生素B₁₂峰与一个降解产物峰（相对保留时间约为1.4），二者的分离度应大于2.5，灵敏度溶液中主峰的信噪比应大于3。精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍（2.0%）。
假维生素B₁₂ 取本品1.0mg，置分液漏斗中，加水20ml 使溶解，加甲酚-四氯化碳（1：l）5ml，充分振摇1分钟；分取下层溶液，置另一分液漏斗中，加硫酸溶液（l→7）5ml，充分振摇，上层溶液应无色；如显色，与同体积的对照液[取高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）0.15ml，加水至250ml]比较，不得更深。
干燥失重 取本品约50mg，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过12.0%（通则 0831）。
【含量测定】避光操作。取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含25μg的溶液，作为供试品溶液，照紫外-可见分光光度法（通则 0401），在361nm的波长处测定吸光度，按C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P的吸收系数（）为207计算，即得。
【类别】维生素类药。
【贮藏】遮光，密封保存。
【制剂】（1）维生素B₁₂注射液（2）维生素B₁₂滴眼液