葛根素注射液

葛根素注射液Gegensu ZhusheyePuerarin Injection
本品为葛根素加适量助溶剂制成的灭菌水溶液。含葛根素（C21H2gO9）应为标示量的93.0%～107.0%。
【性状】本品为无色至微黄色的澄明液体。
【鉴别】（1）取本品适量，加0.5%三氯化铁溶液2～3滴，摇匀，再加0.5%铁氰化钾溶液2～3滴，摇匀，显蓝绿色。
（2）取本品适量，加乙醇制成每1ml中约含葛根素10μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（通则 0401）测定，在250nm的波长处有最大吸收。
【检查】pH值 应为3.5～5.5（通则 0631）。
溶液的颜色 取本品，与黄色2号标准比色液（通则 0901第一法）比较，不得更深。
有关物质 取本品，用溶剂[甲醇-0.1%枸橡酸溶液（25：75）]稀释制成每1ml中约含葛根素0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，用溶剂定量稀释制成每1ml中约含葛根素5μg的溶液，作为对照溶液。另取葛根素和咖啡因各适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中分别含葛根素50μg和咖啡因150μg的混合溶液，作为系统适用性溶液。照高效液相色谱法（通则 0512）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（4.6mm×250mm，5μm）；检测波长为250nm；以0.1%枸橼酸溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，按下表进行梯度洗脱。取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，葛根素峰的保留时间约为14分钟，葛根素峰与咖啡因峰的分离度应大于4.0。精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，在相对保留时间约为2.0和2.2处的色谱峰为8-（β-D-呋喃葡萄糖-1-基）-4'，7-二羟基异黄酮（杂质Ⅰ）峰和8-（α-D-呋喃葡萄糖-1-基）-4'，7-二羟基异黄酮（杂质Ⅱ）峰（必要时用如下方法确认：取葛根素对照品20mg，置20ml顶空瓶中，加水10ml，水浴加热使溶解，密封，于121℃高压蒸汽破坏20分钟，放冷，量取5ml，置20ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，取10μl，注入液相色谱仪，在主峰后应有两个明显的色谱峰，相对保留时间约为2.0和2.2），杂质Ⅰ和杂质Ⅱ的峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（1.5%），其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍（0.5%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍（3.0%）。
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时间（分钟） 流动相A（%） 流动相B（%）
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0
75
25

15
75
25

30
55
45

35
55
45

37
75
25

45
75
25
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丙二醇 精密量取本品1ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取丙二醇对照品适量，精密称定，用甲醇定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。另取丙二醇、1，3-丙二醇和二甘醇对照品各适量，精密称定，用甲醇稀释制成每1ml中各含0.5mg的混合溶液，作为系统适用性溶液。照气相色谱法（通则 0521）测定，用聚乙二醇20M（或极性相近）为固定液，初始温度为50℃，以每分钟30℃的速率升至220℃，维持5分钟；进样口温度为250℃；检测器温度为280℃。取系统适用性溶液lμl，注入气相色谱仪，各组分出峰顺序为：丙二醇、1，3-丙二醇、二甘醇，各组分峰之间的分离度应符合要求。精密量取供试品溶液和对照品溶液各1μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，每1ml中含丙二醇不得过550mg。
二甘醇 取本品5g，精密称定，置10ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取二甘醇对照品适量，精密称定，用甲醇定量溶解并稀释制成每1ml中约含5μg的溶液，作为对照品溶液。照丙二醇项下的色谱条件，分别精密量取供试品溶液和对照品溶液各1μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，含二甘醇不得过0.001%。
异常毒性 取本品，加氯化钠注射液制成每1ml中含葛根素10mg的溶液，依法检查（通则 1141），应符合规定。
热原 取本品5ml，加无热原氯化钠注射液制成每1ml中含葛根素10mg的溶液，依法检查（通则 1142），剂量按家兔体重每1kg缓缓注射5ml，应符合规定。
过敏反应 取本品，依法检查（通则 1147），应符合规定。
溶血与凝聚 取本品，加氯化钠注射液制成每1ml中含葛根素20mg的溶液，依法检查（通则 1148），应符合规定。
无菌 取本品，经薄膜过滤法处理，依法检查（通则 1101），应符合规定。
其他 应符合注射剂项下有关的各项规定（通则 0102）。
【含量测定】照高效液相色谱法（通则 0512）测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1%枸橼酸溶液-甲醇（75：25）为流动相；检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算不低于5000，葛根素峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
测定法 取本品适量，精密称定，用流动相定量稀释制成每1ml中约含葛根素50μg的溶液，作为供试品溶液，精密量取10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取葛根素对照品，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。
【类别】同葛根素。
【规格】（1）2ml：50mg （2）2ml：100mg
【贮藏】遮光，密闭保存。
附：
杂质I

8-（β-D-呋喃葡萄糖-1-基）-4'，7-二羟基异黄酮
杂质Ⅱ

8-（α-D-呋喃葡萄糖-1-基）-4'，7-二羟基异黄酮