注射用α-糜蛋白酶

注射用α-糜蛋白酶

α-Chymotrypsinum pro Injectione

本品为α-糜蛋白酶的灭菌冷冻干燥制品。其效价按干燥品计算，每mg不得低于800单位。

常用制品：（1）每安瓿1 mg；（2）每安瓿5 mg。

【制法】①本品制备工艺如下：

1.糜蛋白酶元的提取和分离

取去净脂肪及结缔组织的新鲜牛胰3 kg，浸入冰冷的0.25 N硫酸溶液中，在5℃以下保存，经绞肉机绞碎成浆，混悬于0.25 N硫酸6 l中，在5℃放置18～24小时，不时搅拌，用二层纱布过滤，残渣再如冰冷的0.25N硫酸3 l，浸1小时，过滤，合并两次浸出液，每L浸出液加入硫酸铵242 g，使达到0.4饱和度，在5℃放置1～2天，虹吸上清液，沉淀过滤，呈灰白色粘性物，每kg胰浆约得100 g。每100 g沉淀加水3000ml，溶解，加饱和硫酸铵溶液200 ml，即产生混浊，用纸浆滤清，滤液加固体硫酸铵205g,滤取沉淀为糜蛋白酶元与胰蛋白酶元的混合物，约得90 g。每100 g沉淀加水160ml、饱和硫酸铵溶液50 ml，用5 N氢氧化钠溶液调pH至5.0，于20～25℃放置2天，过滤，沉淀即为结晶糜蛋白酶元，滤液保留，备制胰蛋白酶。

2.重结晶与活化

取上述α-糜蛋白酶元结晶，加2倍量水，在搅拌下缓缓加入5 N硫酸至溶解，加入一倍量饱和硫酸铵溶液，使达0.25饱和度.加入与5 N硫酸所用量相当的1 N氢氧化钠溶液，此时pH为5.0，20℃放置1～2小时，使结晶完全，得量约为初结晶的80%，含硫酸铵约为50～60%。取此结晶10 g，加水30 ml混匀，滴加5 N硫酸使溶解为止，加入10 ml pH为7.6的磷酸盐缓冲液，加入与5 N硫酸所用量相当的l N氢氧化钠溶液，溶液中加入0.5 mg结晶胰蛋白酶接种活化，5℃放置48小时，使糜蛋白酶元转化为糜蛋白酶。用l N硫酸调pH到4.0，加入硫酸铵25 g，放置2小时，过滤，沉淀溶于0.75倍0.0lN硫酸溶液中，缓缓滴入一倍量饱和的硫酸铵溶液，直到有结晶析出为止，室温放置1小时，至结晶完全，过滤，沉淀即为重结晶的α-糜蛋白酶。

3.透析与冰冻干燥

取上述α-糜蛋白酶10 g。加水30 ml溶解，先以0.05 N硫酸溶液在5℃时透析12～24小时，再用蒸馏水透析至无SO₄为止，透析液过滤，除去不溶物，冰冻干燥。

4.制剂

取检验含格的糜蛋白酶，配成0.5%水溶液，过滤除菌，用无菌操作分装于安瓿中，冰冻干燥后，熔封，即得。

【作用与用途】蛋白质分解酶类，能使血凝块、脓性分泌物和坏死组织等净化，助长新生肉芽，用于眼科手术及松解睫状韧带，减少创伤性虹膜睫状体炎。与抗菌素等同时应用可治疗各种外科炎症：溃疡、脓肿、脓胸、关节积血、扭伤血肿。气管插管后分泌物粘稠肘，可作气管内滴入。亦可用于防止整形外科后的瘢痕收缩。

【用法与用量】临用前，用氯化钠注射液溶解后应用。常用量 肌内注射 一次5 mg，眼科注入房后一次1 mg，3分钟后用氯化钠注射液冲洗前后房中遗留的药液。

【注意】使用过程必须严密观察，如发生过敏反应，应立即停用，该患者以后亦不得再用本品。

【注解】1.糜蛋白酶常与胰蛋白酶综合提取，其详细工艺过程见"注射用胰蛋白酶〞项下。

2.糜蛋白酶的冷冻干燥粉末溶液中，加入一种氨基酸作稳定剂，可保存较长时期的活性。其方法是取糜蛋白酶5 mg（5，500 Armour单位/ml、氯化钠0.9%、甘氨酸5%、硫酸汞0.0l%、加不含热原的蒸馏水适量配成溶液，用醋酸调pH值为4.0，灌装于小瓶中，开始时测定效价为6，240 A.u./ml，然后在45℃贮存8、48与90小时，其效价分别为5，800、5，260、5，340 A.u./ml。其它氨基酸如dl-苏氨酸、dl-缬氨酸、d1-丝氨酸、l-脯氨酸、dl-氮氨酸、羟基l-脯氨酸及dl-色氨酸等亦被采用为稳定剂。