1217 黄体生成素生物测定法

1217 黄体生成素生物测定法
本法系比较尿促性素标准品（S）与供试品（T）对幼大鼠精囊增重的作用，以测定供试品中黄体生成素的效价。
溶剂的制备 试验当日，称取牛血清白蛋白适量，加0.9％氯化钠溶液溶解，制成每1ml中含1mg的溶液，充分溶解后，用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.2±0.2。
标准品溶液的制备 试验当日，按尿促性素标准品中黄体生成素的标示效价，用上述溶剂，按高、中、低剂量组（dS3、dS2、dS1）制成3种浓度的标准品溶液，相邻两浓度之比值（r）应相等，且不得大于1：0.5。一般高浓度标准品溶液可制成每1ml中含8～15单位。调节剂量使低剂量组精囊明显增重，高剂量组精囊增重不致达到极限。标准品溶液置2～10℃贮存，可供4日使用。
供试品溶液的制备 按供试品中黄体生成素的标示量或估计效价（AT），照标准品溶液的制备法制成高、中、低（dT3、dT2、dT1）3种浓度的供试品溶液，相邻两浓度之比值（r）应与标准品相等，供试品与标准品各剂量组所致反应平均值应相近。
测定法 取健康合格，出生19～23日，或体重36～60g，同一来源的雄性幼大鼠，一次实验所用大鼠的出生日期相差不得超过3日，或体重相差不得超过15g；按体重随机等分成6组，每组不少于6只。每日于大致相同的时间分别给每鼠皮下注入一种浓度的标准品溶液或供试品溶液0.5ml，每日1次，连续注入4次，于最后1次注入24小时后，将动物处死，称重，解剖，摘出整个前列腺，由前叶和精囊交界处剥离出精囊，去除附着的组织，用滤纸吸去周围的液体，直接称重（天平精密度0.1mg）并换算成每10g体重的精囊重，照生物检定统计法（通则1431）中的量反应平行线测定法 计算效价及实验误差。
本法的可信限率（FL％）不得大于35％。