前列腺素E2注射液

前列腺素E₂注射液

Injectio Prostaglandini E₂

本品为药用前列腺素E₂的无菌乙醇溶液，每0.5 ml内含2.5 mg前列腺素B₂含量不得少于标示量的85%。

常用制品：0.5 ml内含2.5mg。

【原料与用量】

前列腺素E₂油适量

无水乙醇适量

制成每0.5 ml内含前列腺素E₂2.5 mg。

【制法】取药用前列腺素E₂油，按无菌操作法，充氮，制成无菌乙醇溶液。

【作用与用途】本品供中期或足月妊娠引产。但必须在医生指导下使用。

【用法与用量】用前加等体积0.25%碳酸钠灭菌溶液，继用灭菌生理盐水稀释至每ml含200 μg，供宫腔给药或静脉滴注。

宫腔给药200μg/次，每隔1～2小时给药一次，静脉滴注5μg/分钟，直至流产，或遵医嘱。

【贮藏】本品应置－15℃以下冷暗处保存。

【注解】1.早在40年前K.Kurzrok和C.C.Lieb观察到人类的精液能使人的子宫肌肉有收缩和弛缓作用。1933～1934年M.W.Goldblat和Von Euler分别发现人的精液和羊的精囊腺提取液有降低血压和刺激平滑肌的物质存在。其中有效成分为脂溶性的酸性物质，命名为前列腺素（Prostaglandinum，简称PG）。但直到1962年才由Berg strom将前列腺素分离出来，并阐明了它的化学结构。从此前列腺素的研究有了飞速的发展。1972年开始有专门的杂志发表。同年9月在维也纳召开了一次前列腺素国际会议，对前列腺素的生物合成、代谢、分析方法、生物活性与结构；对呼吸系统、胃肠系统，泌尿系统、循环系统、炎症和神经系统的作用以及对动物生殖道、人体子宫收缩、卵巢功能、甾体激素的生成和终止妊娠、引产、生育力调节等作了报导。

前列腺素是一类具有广泛生理活性的激素。在化学上，它是一类含20个碳原子的脂肪酸化合物，有一个五元环和两个脂肪烃侧链，可分为E、F、A、B及19-羟基五种基本类型。所有E型前列腺秦（即PGE）的五元环上都有11α-羟基和9-酮基。F型（即PGF）与PGE不同之处在于9-酮基被还元为羟基。PG的B、F、A、B型又各细分为2～3个小类型，如E_l、E₂、E₃，F_l、F₂，A₁等等。PGE₁、F₁、A_l及B₁都只含1个l3：14双键，而E₂、F₂与E₃、F₃在脂肪烃侧链上分别含有两个与三个双键。

在医药上目前认为比较重要的几种PG的化学结构式如下：

PG广泛存在于人和动物的各种组织和体液中，有的含量虽微，但生理活性很高。人的精液、羊水、脐带、月经液、子宫内膜，卵巢、肺，肾及肾上腺、神经（中枢及外周）、肠、胃、脾等内均有存在，含量以精液中最高，每ml中含PGE 53.5μg，PGF 8μg，PGA与PGB 50μg，总量平均为225μg/ml。在怀孕期间和分娩时，羊水和脐带中含大量的PGF_1α和PGF_2α。许多种PG（如E₁、E₂、F_2α等）现已能人工合成，并合成了许多类型的新衍生物。

虽然前列腺素具有上述广泛的生理活性，但临床上主要试用于妇产科，认为是一种较有发展前途的控制人类生育的药物。临床研究表明，前列腺素E₂（PGE₂）、F_2α（PGF_2α）在中期妊娠引产、催产及避孕方面都有良好的效果。

2.前列腺素E₂为淡黄色粘稠状油液，微有异嗅，味微苦。几乎不溶于水，微溶于醚，溶于氯仿、乙酸乙酯及pH 8.0的缓冲液中，易溶于乙醇或丙酮。本品经乙酸乙酯-己烷一次结晶，m.p.约为64～66℃。

由于前列脉素化学结构复杂，异构体多，性状不稳定，不易转化分离得纯的前列腺素E₂。在分离、提纯前列腺素E₂过程中要力争时间，严格掌握38℃以下真空、通氮去溶剂，以防止其转化为前列腺素A。

药用前列腺素E₂中含前列腺素E₂小得少于50%。薄层层析应仅有单一前列腺素E₂斑点或含微量前列腺素A，不得有其它杂质斑点。

3.前列腺秦具有广泛强烈的生理活性，在临床应用和基础理论研究方面均十分引人注意。目前获得天然样品的方法有生物合成法、化学合成法和半合成法。目前世界上能生产这类药物的国家尚不多。我国学者贯彻自力更生和综合利用精神，采用忆适台我国情况的路线；其特点是原料丰富、工艺简便、成本较低；其方法是从猪肾上腺中提取花生四烯酸为前体，再从羊精囊腺中提取前列腺素合成酶，并加入谷胱甘肽、氢醌等辅助刺激剂，在充分给氧条件下，使花生四烯酸转化成前列腺素，最后经分离、提纯，得前列腺素E₂。兹简介如下：

药用前列腺素E₂（以下简称PGE₂）结晶的制备：

①PGE₂结晶制备流程图：

*前体——花生四烯酸的制备：用猪肾上腺为原料，以直接电化、加溴、脱溴法获得花生四烯酸甲酯，纯度80~90%。花生四烯酸甲酯经水解、提取、转化成游离酸备用。

**辅助因素——即以谷胱甘肽、氢醌、EDTA-Na₂为辅助因素(用量：每ml反应液谷胱甘肽2微克分子，氢醌0.04～0.06毫克，EDTA-Na₂ 32微克分子)。每kg腺体的酶沉淀物用200ml EDTA-Na₂ 缓冲液混悬，前体及辅助因素用等体积缓冲液配制，酶液与前体液混匀后调节pH至8.0，37℃通氧，搅拌孵育60分钟，加3倍体积量的丙酮终止反应。抽样，加碱异构化，用紫外分光光度法测定转化率，按花生四烯酸纯品重量计，醉促转化率为40～60%。

②PGE₂的分离、结晶：

ⅰ）硝酸银-硅胶柱分离PGE₂：

以硅胶（100～200目）：硝酸银（10：1）为支持剂（100’C烘干30分钟），样品。支持剂=l：20，洗脱展开剂用新展开剂Ⅰ。

以硝酸银-硅胶G薄层追踪，前列腺素E₂的峰区集中于其R_f值为0.33～0.35处。合并PGE₂管，减压浓缩除酸。

ii）PGE₂结晶：

以适量醋酸乙酯溶解PGE₂油，水洗至pH 4～5，以生理盐水洗除银，以无水硫酸钠干燥后，通氮，在36℃以下减压除去乙酸乙酯得PGE₂油。以乙酸乙酯-己烷重结晶2次，m.p.66～67℃（文献报导为68～69℃），所得结晶经紫外、红外吸收光谱、质谱、核磁共振谱等项测定，结果与文献一致。

4.PGE₂含量测定，精密称取本品适量，加无水甲醇溶解使成20微克/毫升，加等体积1 N氢氧化钾甲醇液，或取本品注射液一支，用无水甲醇稀释至250 ml（10微克/毫升），室温（25～30℃）下异构化15分钟，于278mμ处，以0.5N氢氧化钾甲醇液作为空白对照，测定光密度，再按下式计算本品中PGE₂的含量。

药用前列腺素E₂中前列腺素E₂含量（%）= E₂₇₈ / K₂₇₈ ×M×100

样品浓度（mg/ml）

式中：M为前列腺素E₂的分子量（352），

K₂₇₈为前列腺素E₂的克分子消光系数（2.68×10⁴）

E₂₇₈为样品的光密度。

样品浓度为20微克/毫升/2=10微克/毫升=0.01 mg/ml。

代入上式，可简化为：

本品中PGE₂含量（%）=[E/ （2.68×10⁴） ]×352×100

0.01

=E₂₇₈×131.35

5.本品用于中期妊娠引产206例临床观察，效果肯定，成功率高达98.06～99%强，剂量小，产程短，特别是宫腔给药3～4小时后同时静脉滴注催产素时，平均用药剂量仅为1.58 mg，平均产程为13小时35分，出血量少，平均为46.6 ml，副作用小，仅26.24%有轻微消化道反应，感染率低，流产后恢复快，对身体健康无影响，是一种较好的中期引产药。但给药方法不便，尚需进一步改进和提高。目前已有开始对本品长效制剂的研究。