口蹄疫、猪水疱病反向间接血凝试验致敏红细胞诊断液
Foot and Mouth Disease and Swine Vescular DiseaseRIHA Diagnostic Preparation
本品系用口蹄疫病毒A、O、C、Asia I型毒种和猪水疱病病毒毒种分别高度免疫豚鼠或猪，分离血清，提取免疫球蛋白，致敏红细胞制成。用于口蹄疫和水疱病的鉴别诊断。
【性状】静置后，致敏红细胞沉于瓶底，上层为淡黄色透明掖体。振摇后，致敏红细胞均匀分散于溶液中。
【作用与用途】用于鉴别诊断口蹄疫和水疱病的反向间接血凝试验。
【用法与判定】
（1）使用标准阳性血清对0型口蹄疫和猪水疱病进行鉴别诊断时，按以下方法。a.在96孔血凝滴定板上，每份被检样品做4排孔，每孔先各加25μl稀释液。b.每排第1孔各加被检样品25μL，然后分别由左至右进行2倍系列稀释至第7孔（竖板）或第11孔（横板）。每排最后孔留作空白对照。C.加标准阳性血清在第1排和第3排。每孔加稀释被25μL。在第2排，每孔加入l：20稀释的0型口蹄疫标准阳性血清25μL。在第4排，每孔加入1：100稀释的猪水疱病标准阳性血清25μL。放微型混合器上振荡1～2min，加盖，置37℃作用30min。d.加致敏红细胞诊断液在第1排和第2排，每孔加入l%O型口蹄疫抗体致敏红细胞悬液25μL。在第3排和第4排孔，每孔加入1％猪水疱病抗体致敏红细胞悬液25μL。将血凝滴定板置微型混合器上振荡1～2min，加盖，放室温2h后观察结果。e.结果判定若第1排出现2孔以上的凝集（50％以上凝集），且第2排相对应孔出现2个孔以上的凝集抑制；第3、4排不出现凝集，判为口蹄疫O型阳性。若第3排出现2个孔以上的凝集（50％以上凝集），并且第4排对应孔出现2个孔以上的凝集抑制，第1、2排不出现凝集，则判为猪水疱病阳性。以能引起50％红细胞凝集的被检样品最大稀释度为被检样品的血凝效价。
（2）使用标准抗原对口蹄疫各型和猪水疱病进行鉴别诊断时，接下列方法操作。a.被检样品的稀释取试管8支，自第1管开始由左至右用稀释液进行2倍系列稀释（即l：6、l：12、1：24……1：768），每管0.5mL。b.滴加被检样品在血凝滴定板上的第l至第5排，每排的第8孔滴加第8管稀释被检样品2滴，每排的第7孔滴加第7管稀释被检样品2滴，以此类推至第l孔。每排的第9孔滴加稀释液2滴，作为稀释液对照，每排的第10孔按顺序分别滴加A、O、C、Asia I型口蹄疫和猪水疱病标准抗原（1：30稀释）各2滴，作为阳性对照（注意每型换滴管1支）。c.滴加致敏红细胞诊断液先将红细胞诊断液摇匀，于滴定板第1至第5排孔分别滴加A、O、C、Asia I口蹄疫及猪水疱病致敏红细胞诊断液，每孔1滴，置振荡器上振荡1～2分钟，放置20～25℃，1.5～2小时后判定结果。如果被检样品来自牛、羊等偶蹄兽，仅用口蹄疫4个型的致敏红细胞诊断液；如果被检材料来自猪，除用上述4种诊断液外，还用猪水疱病红细胞诊断液。d.结果判定（a）观察血凝板上各排孔的凝集图形，如果只有第1排孔凝集，且稀释液对照孔不凝集，阳性对照孔凝集，则证明此种凝集是与A型红细胞诊断液同型病毒所致的特异性凝集，被检样品即判为A型。若只有第2排孔凝集，其余4排孔不凝集，则待检抗原为0型，以此类推。（b）致敏红细胞50%凝集的被检样品最高稀释度为其凝集效价。（c）出现2排孔以上的凝集时，如某排孔的凝集效价高于其余各排孔的凝集效价至少4倍，即可判为阳性，其余判为阴性。
【注意事项】保存与使用中，勿冻结，勿倒置。
【贮藏】在2～8℃，有效期为6个月。
【规格】5mL/瓶附注：凝集反映强度标准＋＋＋＋100%凝集。红细胞均匀地分布于孔底周围，＋＋＋ 75％凝集。红细胞均匀地分布于孔底周围，但孔底中心有红细胞形成的针尖大的小点。＋＋ 50％凝集。孔底周围有不均匀的红细胞分布，孔底有一红细胞沉下的小点。＋ 25％凝集。孔底周围有不均匀的红细胞分布，但大部分红细胞已沉积于孔底。－ 不凝集。红细胞完全沉积于孔底成一圆点。