青霉素钠

青霉素钠

 Qingmeisuna

Benzylpenicillin Sodiμm 

 本品为（2S，5R，6R）-3，3-二甲基-6-（2-苯乙酰氨基）-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚垸-2-甲酸钠盐。按干燥品计算，含C₁₆H₁₇N₂Na0₄S不得少于96.0%。

 【性状】本品为白色结晶性粉末；无臭或微有特异性臭；有引湿性；遇酸、碱或氧化剂等即迅速失效，水溶液在室温放置易失效。

 本品在水中极易溶解，在乙醇中溶解，在脂肪油或液状石蜡中不溶。

 【鉴别】（1）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。

（3）本品显钠盐鉴别（1）的反应（附录0301）。

 【检查】结晶性取本品少许，依法检查（附录0981），应符合规定。

 酸碱度  取本品，加水制成每1ml中含30mg的溶液，依法测定（附录0631），pH值应为5.0-7.5。溶液的澄清度与颜色取本品5份，各0.3g，分别加水5ml使溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（附录0902）比较，均不得更浓；如显色，与黄色或黄绿色1号标准比色液（附录0901第一法）比较，均不得更深。

 吸光度取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1.80mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录0401），在280nm与325nm波长处测定，吸光度均不得大于0.10；在264nm波长处有最大吸收，吸光度应为0.80-0.88。

 有关物质  取本品适量，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，作为对照溶液；精密量取对照溶液适量，用水定量稀释制成每1ml中约含l.0ug的溶液，作为灵敏度溶液。照高效液相色谱法（附录0512）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾10.6g，加水至1000ml，用磷酸调节pH值至3.4）-甲醇（72：14）为流动相A，乙腈为流动相B；检测波长为225nm，流速为l.0ml/min，柱温为34℃。取青霉素系统适用性对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，取20u1注入液相色谱仪，先以流动相A-流动相B（86.5：13.5）等度洗脱，待杂质E的第3个色谱峰（见参考图谱）洗脱完毕后，立即按下表进行线性梯度洗脱，记录的色谱图应与标准图谱一致。取灵敏度溶液20μl注入液相色谱仪，主成分色谱峰的信噪比应大于10。精密 量取对照溶液和供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）。供试品溶液色谱图中小于灵敏度溶液主峰面积的色谱峰忽略不计。

t_g:青霉素系统适用性对照品溶液中杂质E的第3个色谱峰的保留时间。

 青霉素聚合物照分子排阻色谱法（附录0514）测定。

 色谱条件与系统适用性试验  用葡聚糖凝胶G-l0（40-120un）为填充剂，玻璃柱内径：1.0-1.4cm，柱长：30-40cm，流动相A为pH7.0的0.lmol/L磷酸盐缓冲液〔0.lmol/L磷酸氢二钠溶液-0.1mol/L磷酸二氢钠溶液（61:39）〕，流动相B为水，流速每分钟1.5ml，检测波长为254nm，量取0.1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液100-200u1注入液相色谱仪，分别以流动相A、B进行测定，记录色谱图。理论板数按蓝色葡聚糖2000峰计算均不低于400，拖尾因子均应小于2.0。在两种流动相系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值应在0.93-1.07之间，对照溶液主峰与供试品溶液中聚合 物峰与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值均应在0.93-1.07之间。取本品约0.4g置10ml量瓶中，加0.05mg/ml的蓝色葡聚糖2000溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。量取100-200u1注入液相色谱仪，用流动相A进行测定，记录色谱图。高聚体的峰高与单体与高聚体之间的谷高比应大于2.0。另以流动相B为流动相，精密量取对照溶液100-200u1，连续进样5次，峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。

 对照溶液的制备取青霉素对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含青霉素0.1mg的溶液。

 测定法取本品约0.4g，精密称定，置10ml量瓶中，加水适量使溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取100-200u1注入液相色谱仪，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图。另精密量取对照溶液100-200μl注入液相色谱仪，以流动相B为流动相进行测定，记录色谱图。按外标法以青霉素峰面积计算，含青霉素聚合物的量不得过0.08%。

 干燥失重  取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过0.5%（附录0831）。

 可见异物取本品5份，每份各2.4g，加微粒检查用水溶解，依法检查（附录0904），应符合规定（供无菌分装用）

 不溶性微粒取本品3份，加微粒检查用水制成每1ml中含60mg的溶液，依法检查（附录0903），每1g样品中，含10μm及10μm以上的微粒不得过6000粒，含25μm及25μm以上的微粒不得过600粒（供无菌分装用）

 细菌内毒素取本品，依法检查（附录1143），每1000青霉素单位中含内毒素的量应小于0.10EU（供注射用）

 无菌取本品，用适宜溶剂溶解，加青霉素酶灭活后或用适宜溶剂稀释后，经薄膜过滤法处理，依法检查（附录1101），应符合规定（供无菌分装用）

【含量测定】照高效液相色谱法（附录0512）测定。

 色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以有关物质项下流动相A-流动相B（70：30）为流动相，检测波长为225mn；取青霉素系统适用性试验对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录的色谱图应与标准图谱一致。

 测定法取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取青霉素对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算，其结果乘以1.0658，即为供试品中C₁₆H₁₇N₂Na0₄S的含量。

 【类别】β-内酰胺类抗生素。

 【贮藏】严封，在凉暗干燥处保存。

 【制剂】注射用青霉素钠

 附：

 1.青霉素钠有关物质参考图谱

2.杂质