注射用天花粉

注射用天花粉

Trichosanthes pro Injectione

本品为新鲜天花粉提取物的无菌冷冻干燥制剂。

常用制品：①1支内含1mlg（供皮试用）；②1支内含5mlg（注射用）。

【制法】

1.天花粉提取物的制备法：取新鲜采集的栝楼块根10 kg，经洗净、刨皮、切块、捣碎、压榨等步骤，得含淀粉的原汁，静置过夜，次日吸取上层液，得3，200 ml，用铺硅藻土层（或滤纸浆）的布氏漏斗过滤，滤液置冰浴中冷却，在缓慢搅拌下加入10℃以下的工业丙酮6，400 ml，溶液温度保持在10℃以下，即有大量沉淀析出，待沉淀自然沉降后，倾去（或虹吸）上清液，尽速加入丙酮3，200 ml搅匀后，放置使自然沉降，再倾去上清液，沉淀物再加丙酮1，600 ml重复处理一次。然后将沉淀物以3号或4号垂熔玻璃漏斗过滤，再用丙酮l，600ml脱水成为粉末，用已除去过氧化物的乙醚800 ml洗涤一次，最后真空干燥；得干粉约140 g。

2.注射用天花粉的制备：取天花粉提取物6.5 g，加10℃以下注射用水500 ml溶解，加活性炭1g，搅匀，数分钟后离心，去炭粉和不溶物，上清液经铺有处理过的滑石粉层的布氏漏斗过滤得澄清液，再经6号垂熔玻璃漏斗过滤得无菌澄清溶液，立即在无菌条件下灌装和冰冻干燥。每2 ml安瓿装0.5ml，冰冻干燥后熔封，每安瓿内含5mg注射用天花粉提取物干粉，应得近1000支成品。

【作用与用途】本品为引产药。能使绒毛膜上皮细胞变性坏死，用于中期妊娠、死胎及过期流产等的引产及对宫外孕、葡萄胎患者的治疗，对恶性葡萄胎、绒癌也有一定的疗效。本针剂对中期妊娠引产成功率为96.14%，一次注射引产成功的病例，平均引产时间为6天14小时，对死胎、过期流产引产的成功率为96%，平均引产时间为4天5小时。但本品毒、副作用较大，有待进一步改进。治疗宫外孕，须配合其它中西药使用，用药剂量和方法一般同中期妊娠引产，多数病例于注射后数日内病情稳定，包块缩小，尿妊娠试验转阴性。对葡萄胎，用药后一般均能使胎块组织变性坏死。子宫停止增大或明显缩小，促使尿妊娠试验转阴性。治疗恶性葡萄胎及绒癌，一般于用药2～3次后即可观察到一定疗效。本品对骨髓造血机能无抑制作用，目前多与手术、化疗合并使用。

【用法与用量】本品需在医生指导下使用。临用前以生理盐水溶解，供肌内注射。因本品具有较强抗原性，故注射前须先用0.1微克/0.05 ml作皮内试验，20分钟后皮试阴性者可深部肌内注射0.2 mg，作试探试验，2小时内如无特殊反应，再深部肌内注射5 mg。引产过程中，待胎动，胎心消失后，可酌情加用催产素等其它辅助措施以加速分娩。对恶性葡萄胎及绒毛膜上皮癌患者，根据情况可重复使用（但需注意可能发生过敏反应），必要时将本品用生理盐水溶解后，用输液稀释后供静脉滴注，每次滴注前必须作皮肤试验和注射试探剂量，切忌静脉推注。

【注意】1.本品注射后48小时内，一般发热达38.5℃左右，并伴有四肢疼痛、咽喉痛、头痛、颈项不利及注射局部疼痛等，可给予镇痛药。如出现皮疹可用盐酸异丙嗪或氢化可的松。遇个别严重反应病例，根据病情须及时用大剂量激素（如氢化可的松、地塞米松等），必要时采用冬眠疗法等医疗措施。孕妇在注射后2天内应卧床休息，并严密观察其血压、心脏情况及精神状态，必要时予以适当处理。③本品皮试阳性者及活动性心、肝、肾等疾病并伴有功能不全者以及精神病患者慎用。⑧剂量过大，可引起药物中毒反应，对肾、肝、心脏有一定损害。

【贮藏】本品须避光保存于阴凉处。如发现变色或溶解后溶液浑浊时，则不宜再用。其溶液不稳定，宜在临用前新鲜配制。

【注解】1.天花粉为葫芦科植物栝楼Trichosanthes Kirilowii Maxim的块根。其中药饮片称为天花粉。产于我国华北、西北、华东和辽宁、河南和湖北等地。该试制品采集于浙江省平湖县新仓地区。

自秋来至初春均可采挖，以冬至后到立春前挖取者为佳，将挖出根块洗净，选择色白、粉性足、少纤维、质细嫩、体肥的新鲜天花粉，在3～5 日内加工制成注射用天花粉原料。

2.天花粉的化学成分：皂甙（约1%）、蛋白质、多种氨基酸、糖类及多量淀粉。自鲜根中提取的引产有效成分为一类蛋白质。临床试用2，500余例的统计资料证明，本品对中期妊娠引产的疗效达96%以上，并有使用方便、出血少、痛苦少、无后遗症等特点，而且药源广、价格低，受到广大工农群众的欢迎。但由于天花粉本身具有较强的抗原性，故临床使用时个别病例可能出现过敏反应，目前虽己摸索了一些预防及处理措施，初步制订了用药常规，但尚待进一步提高。

3.为保证用药安全和疗效确切，本品应作毒力试验和疗效试验，以及注射剂的无菌试验等。

毒力试验：取健康雌性小白鼠40只，体重18～20 g，分为四组，每组10只，皮下注射每1 ml含本品2.6 mg的生理氯化钠溶液，备组剂量分别为0.40，0.28，0.20及0.14ml，观察7天。记录各组的死亡率，以小数表示，各组死亡率的总和不得大于2（即不得大于200%）。如任何小剂量组的死亡数多于大剂量组的死亡数，应另取动物重作试验。

疗效试验：取健康雌性小白鼠若干只，体重25 g以上。与雄鼠交配后，选出阴道口有阴栓的小白鼠，另笼饲养10～12天后，选怀孕鼠，皮下注射每1 ml含本品1 mg的生理氯化钠溶液0.2 ml。5天后杀死，立即剖腹，剪开子宫，记录每鼠的死胎仔数、活胎仔数及吸收点数，三者的总和为总胎仔数。活胎仔应见到胎心搏动，死胎仔是指胎心已停博，吸收点是指仅见胎座遗迹。总胎仔数少于6或多于12的小白鼠应弃去不用。每只的总胎仔数为6～12的小白鼠不得少于7只。然后将各小白鼠的记录合并按下列公式计算疗效百分率，疗效百分率不得小于75%。

疗效百分率=（死胎仔数的总和+吸收点数的总和）/总胎仔数的总和×100%

4.蛋白质含量测定：精密称取天花粉提取物约0.5 g，按中国药典1963年版二部附录43页氮测定法第一法测定。

5.按上述方法制备的天花粉提取物，从临床、药理、化学实验证明其有效成分为蛋白质，含量为40～50%，灰分20%左右，糖5～7%，尚有20%左右其它杂质。其蛋白质用琼脂羧甲基纤维素平板电泳鉴定至少含有4～5个斑点，用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳鉴定含有10种左右区带。经药理试验证明，其中一种为有效蛋白质，其它为无效或低效蛋白质。经免疫电泳证明，这些无效蛋白大都具有抗原性，有4～5条免疫弧线。从十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳证明这些无效蛋白质分子量都此较大（一般认为分子量越大越容易引起过敏）。

为了降低临床副作用和减少过敏成分，提高用药安全和药品质量，中国科学院上海有机化学研究所等单位把天花粉蛋白质进一步分离提纯，除去了大部分无效蛋白质和其它杂质。精制的天花粉蛋白经免疫电泳鉴定，减少了能引起过敏的无效蛋白，提高了用药安全和药品质量。经药理试验证明，精制天花粉的疗效比原来提高4倍，剂量从每人每次5～10 mg降低为2mg，经安徽、浙江、上海等几十个单位临床使用一千多例，证明减轻了某些副反应，缩短了引产时间；如采用羊膜注射，其副反应更轻，引产时间更短。

精制天花粉蛋白的化学分析、电冰鉴定、药理试验等结果，见下表：

精制天花粉蛋白的化学分析和药理试验

6.精制天花粉蛋白制备法：

取澄清新鲜天花粉原汁5000ml，用冰水冷却至10℃以下，慢慢加入200 ml左右2 N盐酸，调节pH至4，即有沉淀析出，并慢慢加入0.8倍量（即4000 ml）冰冷的工业丙酮（加丙酮时温度不得超过10℃以_上），又有沉淀产生，离心20分钟，弃去沉淀，得上清液（Ⅰ）。

上清液（I）按上法再加入原汁0.4倍量（即2000 ml）冰冷的工业丙酮，离心，弃去沉淀，得上清液（Ⅱ）。

上清液（Ⅱ）按上法再加入原汁0.5倍量（即2，500ml）冰冷的工业丙酮，离心后得沉淀。沉淀加250 ml蒸馏水溶解，离心（3000转/分）15分钟，除去不溶物，将所得上清液（Ⅲ）在10℃以下流水中透析24～38小时，再离心（3000转/分）15分钟，除去不溶物，得上清液（Ⅳ），经冷冻干燥得精制天花粉蛋白固体16克。总氮量12.97%，水份6.44%，灰份6.48%，蛋白含量为88.3%。琼脂加羧甲基纤维素电泳显一斑点。疗效（怀孕10～12天小白鼠，0.05 mg/只给药）80.4%，LD₅₀10 mg/kg左右。
精制天花粉蛋白目前存在的问题是：针剂的澄明度由于天花粉蛋白容易变性，有时还不够理想；工艺尚应简化；产率尚待进一步提高。